STUDY  IN  GENETICS——


GENE  THERAPY


by  David  Sadava  Ph. D.


For  The  Teaching  Company— 2007


Quote:


NOW  LET’S  TALK  ABOUT  GENE  THERAPY.


IT  IS  A  DRAMATIC  WAY  OF  IMPROVING  A  GENETIC  DISORDER!


THE  SKELETON  MUSCLES  THAT  MOVE  YOUR  ARMS  AND  LEGS  WITH  TWO  TYPES  OF  MUSCLE  FIBRES  -  FAST  AND  SLOW  TWITCH.


SLOW  TWITCH  FIBRES  NEED  A  LOT  OF  OXYGEN  FROM  THE  BLOOD,  TO  WORK  WELL.  THEY  CONTAIN  A  LOT  OF  THE  MIGHT  OF  THE  CELL - CONDRAL  DNA - MITOCHONDRIA = ENERGY  PRODUCING  FACTORIES  IN  THE  CELL.


THESE  PROVIDE  A  LONG  LASTING  POWER  FOR  MUSCLE  CONTRACTION.


SLOW  TWITCH  FIBRES  DON’T  GET  TIRED.


FAST  TWITCH  FIBRES  ARE  DIFFERENT - THEY  DON’T  NEED  AS  MUCH  OXYGEN  AS  SLOW  TWITCH  FIBRES -  AND  FAR  FEWER  MITOCHONDRIAL - THEY  GIVE  QUICK  BURSTS  OF  ENERGY - BUT  GET  TIRED  EASILY.


LOOK  AT  SPRINTERS  IN  ATHLETICS - THEY  HAVE  MUCH  MORE  FAST  TWITCH  FIBRES  THAN  SLOW  TWICH  FIBRES.


DISTANCE  RUNNERS  HAVE  MUCH  MORE  SLOW  TWITCH  FIBRES  THAN  FAST  TWITCH  FIBRES.


A  LOT  OF  THIS  FAST  TO  SLOW  TWITCH  FIBRES  SEEMS  TO  BE  GENETICALLY  ENGINEERED.


YOU  DON’T  HEAR  OF  THE  SAME  PERSON  WINNING  THE  MARATHON  AND  100  METRE  DASH,  IN  THE  OLYMPICS.


DISTANCE  RUNNERS  SEEM  TO  BURN  FAT  DIFFERENTLY - MY  FRIENDS  WHO  RUN  MARATHONS  CAN  EAT  TWICE  WHAT  I  EAT  BUT  NEVER  GAIN  AN  OUNCE - THEY  DON’T  GET  FAT!


ENTER  THE  MARATHON  MOUSE!


NO  THIS  IS  NOT  A  VIDEO  GAME,  OR  CARTOON  CHARACTER - NO  IT’S  A  MOUSE,  TREATED  TO  CHANGE  THE  RATIO  OF  FAST  TO  SLOW  TWITCH  FIBRES - GENE  THERAPY!


RON  EVANS  -  SALK  INSTITUTE  IN  CALIFORNIA,  PRODUCED  THIS  MOUSE  IN  HIS  LABORATORY.


HE  WAS  NOT  LOOKING  FOR  A  SUPREME  ATHLETIC  MOUSE;  HE  WAS  LOOKING  FOR  THE  BREAK-DOWN  THAT  CONTROLS  FAT.  HE  IS  AN  ANTI-OBESITY  RESEARCHER.


EVANS  AND  COLLEGES  FOUND  A  PROTEIN - PEROXISOME  PROLIFERATOR  ACTIVATED  RECEPTOR [ PPARdelta]. I  WILL  REFER  TO  IT  AS  “PPARdelta.”


NOW  THIS  PROTEIN  SEEMS  TO  BE  ABLE  TO  BREAK  DOWN  FAT  TISSUE  IN  STORED  FAT - ADIPOSE  TISSUE - TISSUE  THAT  STORES  FAT.


PUT  IT  MILDLY  THE  DRUG  COMPANIES  GOT  VERY  INTERESTED  IN  WHAT  EVANS  WAS  DOING.


PPARdelta  IS  A  TRANSCRIPTION  FACTOR,  IT  BINDS  TO  THE  PROMOTER  THAT  PRODUCE  THE  GENES,  THAT  ARE  INVOLVED  IN  FAT  BREAKDOWN,  PROMOTERS  AND  TRANSCRIPTION.


GENES  ARE  EXPRESSED  AS  PROTEINS,  THE  INTERMEDIATOR  BETWEEN  GENES  BEING  EXPRESSED  AND  messengerRNA - A  COPY  OF  THE  GENE,  TO  BE  SENT  OUT  TO  THE  RIBOSOME  TO  BE  TRANSLATED  INTO  A  PROTEIN.


SO  A  GENE - PROMOTER - TRANSCRIPTION  FACTOR = DNA TRANSCRIPTION.


TRANSCRIPTION  FACTOR  DO  THE  MAJIC - TURN  GENES  OFF  AND  ON.


PPARdelta  BINDS  TO  THE  PROMOTER  AND  A  NUMBER  OF  AMINO-ACIDS  TO  BREAK  DOWN  FAT.


EVANS  HAD  ALREADY  SHOWN  ALL  THIS  WITH  PPARdelta  THAT  CAUSED  FAT  TO  BREAK  DOWN.


NOW  HE  WONDERED  WHAT  WOULD  HAPPEN  IF  PPARdelta  WAS  HIGHLY  EXPRESSED  IN  MICE  MUSCLES.  MUSCLES  NEED  ENERGY  AND  FAT  BREAKS  DOWN  INTO  ENERGY.


HE  THOUGHT  WELL  THE  FAT  STORED  AROUND  MICE  MUSCLES  WILL  BREAK  DOWN  INTO  ENERGY  FOR  THE  MUSCLES,  AND  GET  LEANER  AS  WELL,  IF  THE  GENE  WAS  EXPRESSED  IN  FAT  TISSUE.


SO  EVANS  DID  GENE  THERAPY  ON  THE  MOUSE.


HE  PUT  THE  GENE  FOR  PPAR  - A PROTEIN  BESIDE  THE  PROMOTER  THAT  WOULD   BE  EXPRESSED  IN  SKELETON  MUSCLE,  THIS  RECOMBINANT  DNA - PUT  IT  INTO  A  VECTOR,  AND  THE  VECTOR  WAS  INJECTED  INTO  A  FERTILIZED  MOUSE  EGGS.


ANIMALS  WITH  RECOMBINANT  DNA  WERE  SELECTED  WITH  A  DETECTABLE  GENETIC  MARKER,  THAT  YOU  ALWAYS  DO  IN  RECOMBINANT  DNA  WORK,  THEN  THESE  ANIMALS  WERE  TESTED  FOR—- WEIGHT  GAIN,  COMPOSITION  OF  MUSCLE  AND  PERFORMANCE.


NOW  THE  RESULTS——  


AS  HE  HYPOTHESIZED,  THE  GENETIC  MODIFIED  MICE  DID  NOT  GAIN  WEIGHT  ON  A  HIGH  FAT  DIET.  THIS  PPARdelta  STIMULATED  FAT  BREAK-DOWN  IN  FAT  STORES  AND  IN  MUSCLE.


THE  UNEXPECTED  RESULT—— THE  MUSCLE  HAD  CHANGED  FROM  A  50/50  RATIO  OF  SLOW/FAST  TWITCH  MUSCLES,  TO  A  MARKED  INCREASE  IN  SLOW  TWITCH  FIBRES.


WHEN  HE  PUT  THE  MICE  ON  AN  EXERCISE-WHEEL  THE  PERFORMANCE  CHANGED  TO  SLOW  TWITCH  FIBRES.


NORMAL  MICE  CAN  RUN  ABOUT  90  MINUTES  OR  900  METRES  BEFORE  GETTING  EXHAUSTED.  THE  GENETICALLY  ALTERED  MICE  COULD  GO  TWICE  AS  LONG  AND  ABOUT  TWICE  AS  FAR.  THEY  WERE  NOW  AS  IF  TRAINED  TO  BE  LONG-DISTANCE  ATHLETES.


CAN  THIS  LEAD  TO  HUMANS  BEING  ABLE  TO  DO  MUCH  BETTER  IN  LONG  DISTANCE  RACES?  WELL  IT’S  UNCLEAR;  BUT  ATHLETIC  AGENCIES  ARE  CONCERNED.


THIS  IS  AN  EXAMPLE  OF  GENE  THERAPY—

THE  ADDITION  OF  GENES  TO  HUMANS  FOR  MEDICAL  PURPOSES.


THERE  ARE  SEVERAL  STRATEGIES  FOR  GENE  THERAPY


GENE  THERAPY  IS  BASED  UPON  A  COUPLE  OF  FUNCTIONS.


1.  WE  KNOW  THE  GENES  INVOLVED  IN  A  DISORDER.


2.  WE  HAVE  A  NORMAL  COPY  OF  THAT  GENE.


3.  WE  KNOW  WHEN  AND  WHERE  THAT  GENE  IS  NORMALLY  EXPRESSED.


4.  WE  KNOW  WHAT  WILL  HAPPEN  WHEN  THAT  NORMAL  GENE  GETS  EXPRESSED  APPROPRIATELY.


ALL  THIS  KNOWLEDGE  IS  COMING  TO  US  QUITE  RAPIDLY  THROUGH  GENETIC  MEDICINE.  THE  MORE  WE  DELVE   INTO  THE  MORE  WE  LEARN  THE  HOWS  AND   WHENS.      


GENE  THERAPY  MUST  DO  THE  FOLLOWING——


   1. GET  THE  GENE  INTO  THE  APPROPRIATE  CELLS.


  2.  GET  THE  GENE  EXPRESSED  IN  THE  CELL.


  3.  GET  THE  GENE  INTEGRATED  INTO  THE  GENOME  OF  THE  TARGET  CELLS.


 4.  IT  MUST  HAVE  NO  BAD  SID EFFECTS.


GENE  THERAPY  HAS  BEEN  THE  STUDY  OF  NUMEROUS  “TRIALS” - EXPERIMENTS,  IN  VARIOUS  HUMANS  WITH  DISORDERS.


THERE  ARE  MAJOR  STRATEGIES  FOR  DOING  GENE  THERAPY,  GOING  FROM  THE  GENERAL  TO  THE  PARTICULAR.


STRATEGIES  FOR  GENE  THERAPY


1.  GENE  AUGMENTATION   


2.  TARGETED  CELL  KILLING


3.  TARGETED  MUTATION   CORRECTION


GENE  AUGMENTATION  IS  USED  FOR  DISEASES,  WHERE  A  FUNCTIONAL  GENE  PRODUCT  IS  LOST.


THE  IDEA  IS  TO  INTRODUCE  EXTRA  COPIES  OF  THE  NORMAL  ALLELE  THAT  HAS  BEEN  MUTATED  IN  A  PERSON.  SO  THE  PROTEIN  FUNCTION  WILL  BE  RESTORED  AND  WORK  NORMAL.


EXAMPLE:  MUSCULAR  DYSTROPHY  IS  A  GOOD  ONE.


WE  KNOW  PEOPLE  WITH  MD,  THEIR  MUSCLES  LACK  THE  PROTEIN  “DYSTROPHIN”  AND  NEED  IT  IN  THE  GENES.


TARGETED  CELL  KILLING  USES  A  GENE  THAT  EITHER  PRODUCES  A  POISEN  THAT  KILLS  CERTAIN  CELLS,  OR  STIMULATES  THE  IMMUNE  SYSTEM  TO  DO  SO.


SO  TARGETED  CELL  KILLING  IS  USEFUL  IN  CANCER  WHERE  IT’S  CALLED  “SUICIDE  CELL  KILLING.”  A  GENE  IS  PUT  INTO  A  CELL  THAT  PRODUCES  A  CHEMICAL  KILLER  OF  THAT  CELL.  IT  GOES  INTO  THE  BODY,  ALL  OVER  THE  BODY,  WHEN  IT  GOES  INSIDE  A  CANCER  CELL  IT  PRODUCES  A  CHEMICAL  THAT  IS  A  POISON  FOR  THAT  CELL - THE  CANCER  CELL  DIES.


COULD  BE  A  GENE  THAT  REACTS  WITH  THE  IMMUNE  SYSTEM  TO  STRIKE  AND  KILL  THE  CANCER  CELL.  A  GENE  THAT  PRODUCES  OR  MAKES  A  PROTEIN  THAT  MAKES  “T”  CELLS.  THE  CANCER  CELL  PUTS  UP  ITS  HAND  AND  SAYS,  “COME  KILL  ME  NOW.”


TARGETED  MUTATION  CORRECTION  REPLACES  A  BAD  ALLELE  WITH  A  GOOD  ONE.


WE  WANT  TO  TAKE  A  BAD  ALLELE  AND  REPLACE  IT  WITH  A  GOOD  ONE.  WE  DO  NOT  WANT  JUST  TO  ADD  A  GOOD  ALLELE;  WE  WANT  TO  TAKE  THE  BAD  ONE  OUT,  RIGHT  OUT,  AND  REPLACE  IT  WITH  A  GOOD  ONE.


THIS  IS  GENE  SHUFFLING.


WE  NEED  TO  GET  THE  BAD  ALLELE/GENE  OUT  AND  NOT  JUST  ADD  A  GOOD  ONE,  AS  THE  BAD  WILL  KEEP  WORKING.


THIS  IS  CALLED  “DOMINANT  NEGATIVE  GENE  PRODUCTION.”


IT’S  NEGATIVE  AND  IT’S  BAD - DOMINANT - NO  MATTER  WHAT  YOU  DO  TO  ADD  GOOD  ALLELES.  THIS  DOMINANT  BAD  ONE  KEEPS  MOVING  ON.  WE  HAVE  TO  GET  RID  OF  IT.


THIS  IS  THE  BAD  GAS  PEDAL  BEING  MADE - TURN  ME  ON  -  KEEP  GOING;  YOU  HAVE  TO  DESTROY  THAT  GENE.


THIS  IS  TARGETED  MUTATION  CORRECTION.


IT’S  BEEN  USED  SUCCESSFULLY  IN  ANIMALS  BUT  NOT  IN  HUMANS [THIS  WAS  UP  TO  2007  WHEN  THIS  LECTURE  WAS  PRODUCED,  NOW  IT  IS  USED  IN  HUMANS - Keith Hunt].


WE  HAVE  USED  IN   HUMANS  THE  FIRST  TWO.


WE  HAVE  NOT  DONE  GENE  THERAPY  ON  THE  HUMAN  EGG  AND  SPERM.  IT  WILL  GO  FIRST  TO  NON-SEX  CELLS.


IT’S  A  LITTLE  AMBITIOUS  AT  THIS  TIME  TO  USE  GENE  THERAPY  ON  HUMAN  SEX  CELLS.


TWO  WAYS  TO  PROCEED,  I  ZERO  IN  MORE.


1.  EX  VIVO  GENE  THERAPY  -  EX = OUTSIDE;  VIVO = LIFE.


CELLS  FROM  TARGET  ORGAN [SAY  THE  LIVER] - TAKEN  OUT - NEW  GENE  IS  ADDED  TO  CELLS  IN  THE  LAB.  THE  CELLS  THEN  PUT  BACK.


CELLS  IN  PARTS  OF  THE  BODY,  EASY  TO  REMOVE.  CAN  NOT  DO  SO  WITH  THE  BRAIN,  BONES  AND  THE  LIKE.  CAN’T  REMOVE THE  BRAIN  AND  CORRECT  IT  AND  PUT  THE  BRAIN  BACK.


2.  IN  VIVO  GENE  THERAPY - IN  LIFE [VIVO = LIFE].


VECTOR  WITH  NEW  GENE  PUT  IN  AN  INJECTOR  NEEDLE  AND  PUT  DIRECTLY  INTO  THE  ORGAN.  COULD  DO  IT  SAY  FOR  THE  SKIN,  OR  MUSCLE,  OR  ON  A  SOLID  TUMOR.


SEVERAL  VECTORS  FOR  GENE  THERAPY——


A  VECTOR,  PIECE  OF  CHROMOSOME  OR  DNA  THAT  IS  RECOGNIZED  AND  CAN  GET  INTO  THE  CELL,  SO  WE  HAVE  SOMETHING  CARRYING  THE  NEW  GENE  INTO  THE  CELL.


THERE  ARE  4  REQUIREMENTS  FOR  A  GOOD  VECTOR—-


1.  EXPRESSION  VECTORS  WITH  ACTIVE  PROMOTERS.  WE  WANT  OUR  GENE  TO  BE  EXPRESSED  IN  OUR  THERAPEUTIC  SETTING.


2.  SMALL  IN  SIZE  SO  WE  CAN  HANDLE  IN   THE  LAB.  A  SINGLE  CELL  HUMAN  CHROMOSOME  HAS  A  HUNDRED  MILLION  BASE  PAIRS  OF  DNA  -  HARD  TO  CUT  AND  SPLICE  WITH  SOMETHING  THAT  BIG.  WE  NEED  SOMETHING  SMALLER.


3.  A  MARKER  GENE,  THAT  WILL  SHOW  THE  VECTOR  GOT  IN,  INTO  THE  TARGET  TISSUE,  BUT  HARMLESS - MIGHT  BE  GREEN  COLOR  PROTEIN  OR  SOMETHING  LIKE  ANTI-BODY  RESISTANCE.


4.  RESTRICTION  ENZYME  SITES  -  CUT  DNA  OPEN  AND  INSERT  GENE  DNA.


GENE  VECTOR - VIRUS——


CAN  MAKE  A  GOOD  IVECTOR - IT  IS  A  PIECE  OF  DNA - IT  HAS  A  CODE - IT  HAS  GENES  FOR  INFECTING  A  CELL - WE  REMOVE  THOSE  GENES  AND  PUT  OURS  IN.  IT  WILL  SHOOT  THEM  INTO  THE  CELL  NUCLEUS.


ALL  OF  THIS  COMES  BECAUSE  OF  OUR  BIOLOGICAL  GENETIC  KNOWLEDGE.


THE  COMMON  GENE  THERAPY  VIRAL  VECTORS——


1.  ADENOVIRUS


2.  ADENO-ASSOCIATED  VIRUS


3.  RETROVIRUS


ADENOVIRUS—  IS  LARGE - SOMETIMES  CAUSES  COLDS.  THE  DNA  OF  THIS  VIRUS  REMAINS  OUTSIDE  ITS  CELL  CHROMOSOMES  AFTER  INFECTION - NEGATIVE  IN  THAT  THE  DAUGHTER  CELLS  WILL  NOT  GET  IT  WHEN  CELLS  DIVIDE - BUT  WILL  HAVE  TO  BE  REPEATED.


IT’S  EASY  TO  ISOLATE  AND  EASY  TO  WORK  WITH.


ADENO-ASSOCIATED  VIRUS— IT’S  SMALL - DOES  NOT  HARM  HUMANS - IN  THIS  CASE  THE  DNA  IS  SPLICED  INTO  THE  CHROMOSOME,  AT  A  SPECIFIC  SITE - WHICH  IS  CHROMOSOME  19,  WITH  OUR  THERAPEUTIC  DNA.


IT’S  SMALL  SO  CAN’T  PUT  IN  A  LARGE  NUMBER  OF  GENES  BUT  IT  IS  WIDELY  USED.


RETROVIRUS— THEY  HAVE  RNA  AS  WELL  AS  DNA - THEY  SPLICE  IN  THEIR  DNA  ANYWHERE  ALONG  THE  GENOME - WELL  AS  98%  OF  GENOME  IS  NOT  GOING  TO  DO  HARM,  GUESS  THAT’S  OKAY.  BUT  WHAT  IF  YOU  GO  TO  THAT  2%  AND  DISRUPT  A  FUNCTIONAL  GENE,  THAT’S  NOT  GOOD  AT  ALL.  SO  WE  RUN  A   RISK  SOMETIMES  WHEN  WE  USE  IT— RETROVIRUS  GENE  THERAPY.


SOME  DNA  AND  RNA  VIRUSES  HAVE  LED  TO  SUCCESSES [UP  TO  2007  WHEN  THESE  LECTURE  WERE  DONE - Keith Hunt]


GOOD  ON  PAPER - GOOD  IN  MICE - BUT  HUMANS,  IT  GETS  MORE  COMPLICATED.


SOME  OF  THE  FAILURES  IN  HUMANS  ARE  THE  FOLLOWING——


1.  GENE  THERAPY  DOESN’T  LAST  LONG - TARGET  CELLS  OFTEN  DIVIDE  RAPIDLY - THE  GENE  DOESN’T  GET  INTO  ALL  THE  CELLS -  AND  BE  FAR  OUT-NUMBERED  SOON - SO  SMALL  MINORITY  GET  THE  DNA  GENE  THERAPY.


2.  PATIENT  MAY  MOUNT  AN  IMMUNE  RESPONSE  TO  THE  VECTOR.


ALL  GENE  THERAPY  WAS  STOPPED  FOR  A  WHILE  IN  1999 - A  BOY  WAS  GIVEN  GENE  THERAPY  AND  DIED  BY  A  MASSIVE  IMMUNE  RESPONSE  AGAINST  THE  GENE  VECTOR.  IT  WAS  NOT  EXPECTED  AND  NEVER  FULLY  EXPLAINED.


3.  MANY  DISEASES  CANNOT  BE  CURED  WITH  A  SINGLE  GENE  THERAPY.


WE  HAVE  TO  KNOW  WHAT  THE  GENE  IS,  THAT  IS  CAUSING  THE  PROBLEM - MULTITUDE  OF  GENES  CAUSE  HEART  PROBLEMS.  DIABETES #1 - MANY  GENES  INVOLVED.  CANCER,  ALZHEIMERS,  AND  OTHERS,  HAVE  MANY  GENES  INVOLVED.


NOBODY  GIVES  MASSIVE  GENE  THERAPY  -  NEVER  DONE  IN  CLINICAL  TRIALS  -  WAY  TOO  COMPLICATED.


SEVERE  COMBINED  IMMUNODEFICIENCY


THE  IMMUNE  SYSTEM  DOES  NOT  WORK  PERIOD!


THE  FAMOUS  “BUBBLE  BOY” - KEPT  ISOLATED  TO  EVERYTHING - LIVED  IN  A  BUBBLE  CONTAINER.  THEY  NEED  BLOOD  TRANSFUSIONS - WAS  GIVEN  ONE  FROM  HIS  SISTER’S  BLOOD - IT  CONTAINED  AN  INFECTION  NO  ONE  KNEW  WAS  THERE - THE  BUBBLE  BOY  DIED - NO  IMMUNE  SYSTEM  TO  FIGHT  IT  OFF.


SCIENCE  THEN  TRIED  GETTING  THE  PROTEIN  AND  GIVING  IT  THROUGH  GENE  THERAPY;  IT  WAS  MODERATELY  SUCCESSFUL. 


[THERE  ARE  VARIATIONS  OF  IMMUNE  DEFICIENCY  PROBLEMS.  WHEN  I  LIVED  IN   OSHAWA,  ONTARIO,  ONE  YOUNG  LADY  CAME  DOWN  WITH  AN  IMMUNE  DISEASE.  SHE  HAD  NO  IMMUNE  SYSTEM  TO  FIGHT  OFF  PAINT,  MAN  MADE  MATERIALS,  AND  ALL  THE  STUFF  OUTSIDE.  EVENTUALLY  SHE  HAD  TO  LIVE  IN  A  COUNTRY  HOUSE,  WITH  NO  MAN  MADE  MATERIALS, BUT  HARDWOOD  FLOORS  WAS  OKAY.  THE  HOUSE  HAD  TO  BE  IN  AN  AREA  WHERE  FARMERS  DID  NOT  USE  ANY  MAN  MADE  CHEMICALS.  IN  THIS  ENVIRONMENT  SHE  WAS  FINALLY  ABLE  TO  TAKE  WALKS  OUTSIDE.  I  LEFT  OSHAWA  SHORTLY  AFTER  ALL  THIS  WAS  ON  THE  NEWS,  SO  NEVER  DID  FIND  OUT  HOW  SHE  PROGRESSED  FROM  THAT  SITUATION  -  Keith Hunt]


IN  THE  1990s  EX-VIVO  GENE  THERAPY  WAS  TRIED.


PATIENTS  WHITE  BLOOD  CELLS  WERE  REMOVED;  THE  NORMAL  ADA  GENE  VECTOR  WAS  PUT  IN.  CELLS  THEN  PUT  BACK  INTO  THE  PATIENT,  HOPING  TO  DIVIDE  AND  FORM  GOOD  WHITE  BLOOD  CELLS.  AND  THEY  DID - THE  PATIENTS  NEED  FOR  ADA  WAS  REDUCED - MODERATE  SUCCESS.  IT  HAS  BEEN  REPEATED  ON  OTHER  PATIENTS.


FAMILIAL  HYPERCHOLESTOROLOMIA


FAMILY  GROUP  OF  HIGH  BLOOD  CHOLESTEROL.


THE  PATIENT  CANNOT  REMOVE  CHOLESTEROL  FROM  THE  BLOOD  WHEN  HE/SHE  EASTS.


A  PROTEIN  THAT  DOES  THIS  IS  NON-FUNCTIONAL  TO  SEND  IT  TO  THE  LIVER  TO  BREAK  DOWN.  INSTEAD  THE  PROTEIN  IS  NOT  THERE  AND  SO  CHOLESTEROL  STAYS  IN  THE  BLOOD.


FIRST,  A  PIECE  OF  LIVER  WAS  REMOVED,  CELLS  SEPARATED  IN  THE  LAB.  A  GENE  FOR  THIS  RECEPTOR  PROTEIN  WAS  ADDED  TO  THE  NORMAL  VECTOR,  THEN  PUT  BACK  IN  PROTEIN.  LIVER  IS  VERY  PLASTIC  AND  SO  ALL  FUSSED  TOGETHER.  THE  LIVER  MADE  ENOUGH  RECEPTOR  PROTEIN  TO  REMOVE  CHOLESTEROL  FROM  THE  BLOOD,  THE  PATIENTS  CHOLESTEROL  WENT   DOWN.  MODERATELY  SUCCESSFUL.


ORNITHINE  TRANSCARBANYLASE  DEFICIENCY


PATIENTS  CANNOT  BREAK  DOWN  AMONIA  WHEN  BROKEN  DOWN  BY  AMINO  ACIDS  WHEN  DIGESTED.  IT  IS  VERY  TOXIC  TO  HUMANS,  WHO  USUALLY  DIE  WITHIN  A  YEAR  OF  BIRTH.  MILDER  CASES  CAN  LIVE  FOR  YEARS  ON  A SPECIAL  DIET  WITH  AMONIA  REDUCING  DRUGS.


IN  VIVO  GENE  THERAPY  WAS  DONE  WITH  A  VECTOR  NORMAL  GENE  INJECTED  INTO  THE  ARTERY  LEADING  TO  THE  LIVER.  THE  VIRUS  INFECTED  THE  LIVER  CELLS - THE  LIVER  DID  EXPRESS  THE  ENZYMES  LOWERING  AMONIA  LEVELS.  IT  HAS  ONLY  BEEN  DONE  ON  MIDER  CASES [AS  OF  2007].


CANCER


GENE  THERAPY  IS  USED  THE  MOST  ON  CANCER.


TWO  APPROACHES


1.  IN  VIVO  -  LUNG  CANCER  WITH  P53  NOT  FUNCTIONING  DUE  AS  WE  HAVE  SEEN  TO  SMOKING.  A  GOOD  P53  IS  INJECTED  AND  PATIENTS  HAVE  LIVED  LONGER.


2.  EX  VIVO  -  TARGET  KILLING,  BY  THE  REMOVAL  OF  WHITE  BLOOD  CELLS.  “T”  CELLS  REMOVED  AND  THE  ADDITION  OF  T  CELL  RECEPTOR - THEY  HOME  IN  AND  BIND  TO  AND  KILL  CANCER  CELL  TUMOR.  SUCCESSFUL  FOR  MELANOMA.  


MUSCLES


GRADUALLY  STRENGTH  GOES  DOWN  -  FROM  AGE  30  IT  DECREASES  UP  TO  30%  AS  WE  GO  INTO  OLD  AGE.  [AH  YES  THE  PHRASE  “THE  STRENGTH  OF  YOUTH”  IS  A  FACT  OF  LIFE - Keith Hunt]


THE  DISABLED - NOT  BEING  ABLE  TO  USE  MUSCLES  THE  BODY  DOES  NOT  REPAIR  MUSCLES  NOT  USED.


LEE  SWEENEY  AT  THE  UNIVERSITY  OF  PENNSYLVANIA  IS  STUDYING  MUSCLE  REPARE - WHAT  GOES  INTO  MUSCLES  AND  THEIR  REPARE  MECHANISM.


HE’S  FOUND  TWO  GENES  INVOLVED  AND  THE  PROTEIN  CODED  FOR  THEM.


1. IGF-1  STIMULATES  NEARBY  CELLS  TO  PROMOTE  MUSCLE  BUILDUP.


2.  MYOSTATIN  STIMULATES  MUSCLE  BREAKDOWN.


SO  HE’S  BEEN  DOING  GENE  THERAPY  AND  HE’S  DOING  IT  ON  MICE  FIRST.


BY  ADDING  THE  GENE  FOR  IGF-1  THE  BUILDUP  PROTEIN,  TARGETED  TO  THE  MUSCLES  IN  MICE  BY  GENETIC  MODIFIED  OR  GENE  THERAPY;  AND  LOW  AND  BEHOLD  MUSCLES  GOT  BIGGER.  THEN  HE  MAKES  ANOTHER  VECTOR  AND  IN  IT  WHAT  BLOCKS  MYOSTATIN. SO  NO  BREAKDOWN  AND  HENCE  BIGGER  MUSCLES  STILL.


CLINICAL  TRIALS  ARE  PLANNED  ON  PATIENTS  WITH  MUSCLE  WASTING [AS  OF  2007]


BUT  WILL  ATHLETES  GET  TO  IT  FIRST?


MORE  CONCERN  FOR  PRO  ATHLETIC  COMPETITIONS  SUCH  AS  THE  OLYMPICS.


GENE  THERAPY  HAS  POTENTIAL!


BUT  SO  DOES  CLONING  AND  STEM  CELLS.


End Quote


………………………..


SO  WE  HAVE  SEEN  IN  THESE  LECTURE  STUDIES  THE  INTRICATE  AND  MIND-BENDING  DETAILS  OF  THE  HUMAN  DNA  AND  MANY  THINGS  RELATED  TO  IT.


THE  MORE  MAN  DELVES  DEEPER  INTO  JUST  ABOUT  ANYTHING  WE  DELVE  INTO  TO  LEARN  ALL  ABOUT  IT,  THE  MORE  AMAZING  IT  BECOMES.


TO  THINK  WE  CAN  JUST  BRUSH  THIS  OFF  AS  MERE  “EVOLUTION”  AS  IT  SUPPOSEDLY  CAME  FROM  A  SINGLE  CELL  SOMEWHERE  IN  THE  SEA  MILLIONS  OF  YEARS  AGO,  TO  DIVIDE  AND  EVENTUALLY  DEVELOP  INTO  HUMAN  BEINGS  AS  WE  ARE  TODAY  OVER  MILLIONS  OF  YEARS,  IS  TO  ME  THE  SILLIEST  AND  CRAZIEST  IDEA,  FROM  WAY  OUT  PLANET  PLUTO  IDEAS  AND  BEYOND.


THE  BIBLE  SAYS  WE  ARE  WONDERFULLY  MADE.


FOR  A  NORMAL  HEALTHY  PERSON  TO  LIVE  IN  A  NORMAL  HEALTHY  PHYSICAL  BODY,  TAKES  MILLIONS  OF  TINY  THINGS  ALL  WORKING  CORRECTLY  AND  IN  HARMONY  TOGETHER.


TRULY  THE  INNER  WORKING  OF  THE  HUMAN  BODY,  PROVES  A  MASTER  MIND  IS  BEHIND  IT  ALL.


AND  THAT  IS  JUST  LOOKING  AT  THE  HUMAN  BODY;  WHEN  YOU  LOOK  AT  ALL  THE  OTHER  CREATED  THINGS  ON  THIS  PLUE  PLANET,  I  SUBMIT  TO  YOU  THERE  WAS  A  MASTER  MIND  BEHIND  IT  ALL.


AS  A  KID  OF  4, 5, 6, AND 7,  I  WAS  FASCINATED  BY  ALL  I  COULD  SEE  AROUND  ME,  FROM  THE  LADY-BUG,  TO  THE  CATERPILLAR,  TO  THE   BUTTERFLY,  TO  THE  BIRDS,  TO  CATS  AND  DOGS,  TO  THE  HORSE,  TO  THE  TREES,  TO  THE  RIVERS,  TO  THE  GEEN  GRASS  AND  ETC.


MY  FATHER  SENT  ME  AT  AGE  7  TO  A  CHURCH  OF  ENGLAND  SCHOOL.  THE  VERY  FIRST  DAY  WE  WERE  GIVEN  A  BIBLE.  WE  WERE  TOLD  TO  OPEN  IT  TO  PAGE  1.  THE  TEACHER  READ— “IN  THE  BEGINNING,  GOD  CREATED  THE  HEAVENS  AND  THE  EARTH…..”—— SHE  CONTINUED  TO  READ…..

WOW,  IT  WAS  LIKE  A  LIGHT  SWITCH  IN  MY  HEAD  WAS  TURNED  ON—— AH  THAT  IS  IT  I  SAID  TO  MYSELF;  A  BEING  CALLED  “GOD”  MADE  EVERYTHING  I   COULD  SEE;  YES  THAT  IS  THE  ANSWER  I  TOLD  MYSELF—- THERE  IS  A  GOD  BEING  BEHIND  IT  ALL.


I  BELIEVED  IN  GOD  FROM  THAT  DAY  FORWARD.


I  LOOK  BACK  NOW,  AND  I  SEE  IT  WAS  GOD’S  HAND  IN   HAVING  MY  DAD  SEND  ME  TO  A  CHURCH  OF  ENGLAND  SCHOOL.


THE  FIRST  HALF  HOUR  OF  EACH  SCHOOL  DAY  WAS  SPENT  IN  THE  BIBLE.


I  LOVED  IT,  I  ATE  IT  UP  AS  THEY  SAY.


IT  WAS  A  GREAT  AND  WONDERFUL  FOUNDATION.  IT  SERVED  ME  WELL  AS  I  BECAME  AN  ADULT,  AND  GOD  DECIDED  TO  REVEAL  MORE  AND  MORE  TRUTHS  OF  HIS  WORD  TO  ME  OVER  DECADES.


MY  WEBSITE  IS  THE  CULMINATION  OF  ALL  THOSE  DECADES,  OF  READING  AND  STUDYING,  SOMETIMES  DAYS,  WEEKS,  MONTHS,  YEARS,  ON  A  BIBLE  SUBJECT [MY  BOOK  ON  “DIVORCE  AND  RE-MARRIAGE” TOOK  ME  4  YEARS  TO  COMPLETE.


I  AM  BLESSED  THE  LORD  GAVE  ME  A  CLEAR  MIND,  TO  ACKNOWLEDGE  THAT  OTHERS  HAVE  WRITTEN  A  STUDY  OR  BOOK,  THAT  IS  THE  TRUTH  OF  THE  MATTER  ON  THAT  SUBJECT.  MANY  ARE  ON  THIS  WEBSITE. 


I  HOPE  THIS  STUDY  OF  GENETICS - DNA - HAS  BEEN  AN  EYE  OPENER  AND  BLESSING  TO  YOU.


Keith Hunt